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作者：张俊鹏;刘文婷;石甜;王华娟;王宏勋;周敏;
单位：武汉轻工大学食品科学与工程学院;武汉轻工大学生命科学与技术学院;
摘要：目的：分析1株副溶血性弧菌噬菌体474x1的生物学特性、全基因组及在食品中的抑菌效果。方法：以副溶血性弧菌474菌株为宿主菌，从海鲜市场基围虾分离噬菌体474x1，利用透射电镜观察其形态，并绘制一步生长曲线，分析474x1对温度及pH的敏感性。分析474x1全基因组序列，根据474x1末端酶大亚基构建系统进化树。通过测定菌落总数评价噬菌体对虾肉中副溶血弧菌的抑制效果。结果：分离到1株新型的副溶血弧菌噬菌体，命名为474x1，该噬菌体能够裂解23株副溶血弧菌中的19株（19/23=82.61%）。电镜观察474x1具有典型的短尾病毒科病毒形态特征。最佳感染复数（MOI）为0.01，一步生长曲线显示474x1的潜伏期为10 min，裂解量为115 PFU/cell。该噬菌体能够在较大的温度范围（30～60℃）和pH(4～11)范围内维持活性。474x1全基因组长47830 bp，包含69个开放阅读框（open reading frames,ORFs），其中14个具有特定功能的基因。比较基因组学分析474x1与短尾噬菌体科弧菌属噬菌体Vp41s3基因组具有较高同源性，进化分析表明474x1与副溶血弧菌噬菌体Vp41s3亲缘性最高。在应用实验中，在4℃下MOI=1000的实验组在第3 h相较对照组菌量下降了0.39 lgCFU/mL。MOI=10000的实验组在第12 h相较对照组菌量下降了0.92 lgCFU/mL，在25℃下MOI=1000,MOI=10000的实验组相较对照组在第6 h时菌量分别下降1.04、1.82 lgCFU/mL，表明噬菌体474x1能够显著抑制虾肉中宿主菌的生长。结论：从基围虾中分离鉴定1株新的副溶血性弧菌噬菌体，该噬菌体裂解量大，潜伏期短，在60℃以下表现出较好的稳定性，pH耐受范围宽，在食品中也有良好的抑菌效果，为防控水产品副溶血性弧菌的致病株奠定了基础。
关键词：副溶血弧菌噬菌体;;分离与纯化;;最佳感染复数(MOI);;一步生长曲线;;基因组;;抑菌试验
基金资助：国家自然科学基金项目（31471660）;; 十三五国家重点研发专项（2017YFC1600100）;; 武汉轻工大学校级科研项目（2021Y02）;; 湖北省教育厅科学技术研究项目（Q20211606）
