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作者：黄帆;孙西同;李佥;李苗;郭小宇;韩雨擎;孙芳鸿;方艺蒙;李宪臻;
单位：大连工业大学生物工程学院;大连工业大学轻工与化学工程学院;
摘要：为提高柚苷酶的稳定性，本研究制备了一种新型海藻酸钠/聚乙烯亚胺/环氧硅烷复合气凝胶（SKP）用于柚苷酶的固定化。结果显示，该气凝胶具有三维多孔结构，且含有大量的氨基官能团，能有效固定化柚苷酶。SKP的最优工艺条件为：聚乙烯亚胺（PEI）分子量为10000 Da，添加量为0.3 g。将SKP用于柚苷酶的固定化研究，得出固定化柚苷酶的最优工艺条件为：固定化时间6 h，固定化温度30℃，固定化pH2.5，初始酶活力349.43 U/mL。固定化柚苷酶的最佳反应温度为50℃，最佳反应pH为4.0，在循环使用8次后，仍保留60%的初始酶活，在4℃条件下储藏30 d后仍具有高达90%的初始酶活，游离柚苷酶只保留了41.32%的初始酶活。固定化柚苷酶的酶活半衰期为10.46 h，较游离柚苷酶的半衰期（4.38 h）有明显提升。固定化柚苷酶的载酶率、酶活回收率和最大酶活分别为94.65%、81.65%和673.68 U/g。基于本文的研究结果，说明SKP气凝胶可用于固定化柚苷酶，经过工艺优化后固定化柚苷酶具有优良的储藏稳定性及较好的热稳定性，为固定化柚苷酶的工业化应用提供了新的理论依据和应用基础。
关键词：海藻酸钠;;复合气凝胶;;固定化;;柚苷酶;;工艺优化
基金资助：国家自然科学基金青年基金项目（31601411,21804129,22108024）;; 辽宁省教育厅科学研究项目（JYTMS20230423）
