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作者:张亚娟;董志昊;祖利佳;王坤;李丹;左锋;
单位:黑龙江八一农垦大学食品学院;黑龙江八一农垦大学国家杂粮工程技术研究中心;粮食副产物加工与利用教育部工程研究中心;
摘要:为了研究英国红芸豆多肽组分对乙醇诱导的胃黏膜上皮细胞损伤的保护作用。通过酶解英国红芸豆蛋白制备并纯化多肽组分,选择分子量<1 kDa中不同浓度多肽组分2对GES-1胃黏膜上皮细胞进行预处理。检测乙醇诱导下,GES-1胃黏膜上皮细胞氧化应激、凋亡率、线粒体膜电位以及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)通路相关蛋白表达水平。结果表明,分子量<1 kDa的酶解物经G15葡聚糖凝胶分离纯化后得到两个组分,其中组分2的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical,DPPH)自由基清除率(41.82%±0.93%)、羟自由基清除率(67.79%±0.74%)以及还原力(0.23±0.01)较强,选择组分2进行后续实验。组分2(50、100、200μg/mL)预处理降低了乙醇诱导的GES-1细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛含量,提高了超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05),且呈剂量效应关系。流式细胞术结果显示,组分2预处理均显著抑制乙醇诱导的细胞凋亡及细胞线粒体膜电位下降(P<0.05)。此外,组分2预处理还降低了乙醇诱导的GES-1细胞内NLRP3、半胱天冬酶-1(cysteine aspartase-1,Caspase-1)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)蛋白水平以及细胞液中IL-1β的浓度。综上所述,英国红芸豆多肽组分在细胞水平上保护乙醇诱导的胃黏膜上皮细胞损伤,为红芸豆营养健康食品的开发提供了一定的实验依据。
关键词:英国红芸豆多肽组分;;乙醇;;GES-1细胞;;活性氧(ROS);;NLRP3信号通路
基金资助:多豆源特色豆制品品质调控关键技术研究(2041040001);; 黑龙江省杂粮生产与加工优势特色学科项目(2022-78)