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作者：刘鑫;罗唐君;丰源;赵成周;韩丽娟;桂林生;侯生珍;孙胜男;
单位：青海大学医学院;青海大学农牧学院;
摘要：以藏羊脾脏为原料，优化脾多肽的酶解制备工艺并进行抗氧化与抗炎活性测定。以水解度为考察指标，选取风味蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行最适蛋白酶筛选。在此基础上，分别考察酶解温度、p H值、时间、物料比和酶添加量等因素对最适蛋白酶酶解效率的影响，进一步采用正交试验优化酶解参数，确定最佳酶解条件。通过测定脾多肽对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基和2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基的清除率，分析脾多肽的抗氧化活性。通过脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症试验，分析脾多肽的抗炎活性。结果表明，脾多肽的最佳水解酶为风味蛋白酶，在温度55℃、物料比14%和酶加量1050 U/g的条件下酶解4 h，可达到脾多肽的最大水解度，为48.75%。活性检测结果表明，脾多肽对DPPH自由基和ABTS阳离子自由基的清除能力接近阳性对照维生素C,IC_(50)分别为(0.2739±0.0183)mg/m L和(0.3410±0.0322)mg/m L，表现出较强的抗氧化活性，且呈现浓度依赖性；细胞炎症试验表明，脾多肽能有效调节炎症细胞中NO、白细胞介素-1β(Interleukin-1β, IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α等炎性因子的表达水平，抑制率分别降低了50.16%、32.59%和23.41%，表明其具有一定的抗炎活性。研究通过工艺优化确定了藏羊脾多肽的制备条件，并检测了脾多肽的抗氧化与抗炎活性，为藏羊脾脏产品的开发利用提供一定依据。
关键词：藏羊脾多肽;;酶解法;;抗氧化;;抗炎
基金资助：青海省“帅才科学家负责制”项目(2022-NK-169-4)
