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作者:赵丽;陈晓兰;黄栩;刘彦滟;徐加兵;颜翠萍;肖淑珺;
单位:江苏农牧科技职业学院动物药学院;江苏省药品监督管理局审核查验中心;泰州市药品检验院;南京医科大学附属泰州人民医院;
摘要:目的:建立实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, Q-PCR)和胶体金免疫层析2种方法,用于对肉类制品中的乙型副伤寒沙门氏菌的检测,并比较2种检测方法的优缺点。方法:Q-PCR的建立,选择乙型副伤寒沙门氏菌16S rDNA位点为靶基因,设计引物与探针,对肉制品中乙型副伤寒沙门氏菌进行检测。胶体金免疫层析法,对家兔进行免疫,获得乙型副伤寒沙门氏菌多克隆抗体,采用胶体金免疫层析技术进行试纸条的制备。分别采用2种方法对24份经人工污染乙型副伤寒沙门氏菌的肉类制品样品进行检测,对结果差异进行比较。结果:Q-PCR法的检出限为1.8 CFU/25 g,胶体金免疫层析法的检出限为9 CFU/25 g。Q-PCR法与微生物法结果符合率为100%,而胶体金免疫层析法无法检测肉制品中低污染水平的乙型副伤寒沙门氏菌。结论:对2种方法检测的结果进行分析,准确度上Q-PCR法要优于胶体金免疫层析法,Q-PCR法检测限更低,灵敏度更高;但从检测耗费时间来分析,胶体金免疫层析法更加简便快捷,适合快速检测,而Q-PCR适合作为更加精确的检测和最终确认。
关键词:实时荧光定量聚合酶链式反应;;胶体金免疫层析;;乙型副伤寒沙门氏菌;;肉制品
基金资助:江苏农牧科技职业学院2023年校级科研项目(NSF2023ZR19)