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作者：袁磊;刘明明;张明娟;秦爱;余秋地;王娟;肖昭竟;
单位：重庆市计量质量检测研究院,国家农副加工产品及调味品质量检验检测中心;
摘要：文章建立一种能够同时快速检测食品中蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和蕈状芽孢杆菌的三重实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qPCR)方法。以蜡样芽孢杆菌gyrb基因、苏云金芽孢杆菌cry基因和蕈状芽孢杆菌N451-2染色体为靶标，设计引物和探针，建立多重q PCR方法，并对该方法进行相关验证，并通过模拟和实际样品进行评价。结果表明，该多重qPCR方法特异性强，仅能特异性扩增3种目标菌；灵敏度高，3种目标菌的最低检出限为130 CFU/mL；稳定性良好，重复性实验中3种目标菌Ct(Cycle threshold)值的变异系数均<2%；可靠性强，实际样品(含人工污染样品)的检测结果与国标方法基本一致。该多重q PCR方法可以用于食品中蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和蕈状芽孢杆菌的检测。
关键词：蜡样芽孢杆菌;;苏云金芽孢杆菌;;蕈状芽孢杆菌;;多重实时荧光定量PCR
基金资助：重庆市市场监督管理局科研计划项目(CQSJKJDW2023004)
