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作者：张淘崴;乌日娜;纪帅奇;娄梦雪;马颖;武俊瑞;
单位：沈阳农业大学食品学院;辽宁省食品发酵技术工程研究中心;沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室;
摘要：本研究首先从东北传统豆酱中分离筛选出一株具有良好抑菌作用的菌株，结合16S rDNA与持家基因gyrA测序分析等方法对菌株鉴定。其次，利用乙酸乙酯萃取法对其所产细菌素进行粗提，使用葡聚糖凝胶Sephadex-G50和高效液相色谱（HPLC）技术进一步纯化，结合SDS-PAGE和液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术进行鉴定。最后通过最小浓度实验与生长抑制曲线分析了细菌素对金黄色葡萄球菌的抑制效果，并探究了细菌素对热、酸碱和蛋白酶的稳定性。结果表明，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌株S1-2对金黄色葡萄球菌和单增李斯特氏菌抑菌效果最好，该菌株产生的细菌素经分离纯化鉴定为subtilosin A，分子量约为3 kDa，对金黄色葡萄球菌和单增李斯特氏菌有明显的抑制效果，对金黄色葡萄球菌的最小抑制浓度为0.625 mg/mL。该细菌素在20～80℃抑菌活性稳定，且在100～120℃仍表现出抑菌活性；对酸碱耐受性较高，经过pH为1、10的强酸强碱处理后仍表现出抑菌活性，在pH6.0～8.0的范围内表现出最高的抑菌活性；能够被蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶水解。综上，枯草芽孢杆菌S1-2与其产生的细菌素subtilosin A在食品生物防腐中具有较强的研究和应用潜力。
关键词：枯草芽孢杆菌;;细菌素;;分离纯化;;抑菌
基金资助：国家自然科学基金面上项目（32172279）;; 沈阳市科技创新平台项目（21-103-0-14,21-104-0-28）
