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作者：蒋笑笑;梅轩玮;刘冠辰;张玉莹;孙海涛;陈环环;常耀光;薛长湖;
单位：中国海洋大学食品科学与工程学院;青岛海洋科学与技术试点国家实验室,海洋药物与生物制品功能实验室;
摘要：β-1,3-木聚糖是紫菜等海藻中的重要结构多糖。多糖结合蛋白是多糖研究的关键工具,常被用作探针服务于多糖的原位分析;其中,碳水化合物结合结构域(carbohydrate-binding module,CBM)是一类被广泛应用的多糖结合蛋白。该研究从公共基因数据库中挖掘得到了一条潜在具有β-1,3-木聚糖结合能力的CBM6家族序列,并对该序列进行了异源表达及亲和纯化,得到电泳纯蛋白,命名为VaCBM6。该蛋白表现出对β-1,3-木聚糖的特异性结合能力,结合常数为3.0×10~5(mol/L)~(-1)。将该蛋白与绿色荧光蛋白EmGFP融合表达构建出首个β-1,3-木聚糖的特异性荧光探针,以该探针为工具实现了紫菜中β-1,3-木聚糖的荧光显微观察,证实了VaCBM6在β-1,3-木聚糖原位分析中的良好应用潜力。VaCBM6的挖掘与表征为β-1,3-木聚糖的研究与开发提供了良好工具。
关键词：β-1,3-木聚糖;;紫菜;;碳水化合物结合结构域;;荧光探针;;原位分析
基金资助：国家自然科学基金项目(961231071200)
