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作者：黄铭;吴佳欣;张目;王水平;胡晓清;
单位：江南大学生物工程学院;广州悦荟化妆品有限公司;
摘要：神经酰胺是应用于化妆品和药品的一类脂质分子,利用微生物代谢工程合成神经酰胺具有重要前景。巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)是优良的工业宿主,目前尚无利用P. pastoris强化神经酰胺的研究。首先构建P. pastoris GS115ΔPAS＿chr3＿0329(G-K)作为底盘,然后在G-K中敲除神经酰胺合成负反馈基因PAS＿chr4＿0427(G-KO),并利用脂质组学技术探究神经酰胺的组成及含量变化。结果表明,与G-K相比,G-KO中神经酰胺在总脂质中相对含量增加了628.13%,达到9.32%;并促进合成更多具有不饱和长链碱基的神经酰胺。与此同时,G-KO中鞘脂相对含量增加,而磷脂相对含量降低。对P. pastoris中神经酰胺丰度最高的Cer(d18∶0)神经酰胺进行HPLC分析,显示G-KO中Cer(d18∶0)神经酰胺合成量达90.22 mg/L,相比G-K提升了872.20%。该研究证实P. pastoris可用于神经酰胺合成,PAS＿chr4＿0427缺失株G-KO具有良好的神经酰胺合成能力,具有工业发酵制备神经酰胺的潜力。
关键词：巴斯德毕赤酵母;;神经酰胺;;敲除;;脂质组学
基金资助：国家重点研发计划政府间国际科技创新合作项目(2023YFE0104400)
