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作者：肖枫伟;孙江;叶家影;李利君;倪辉;
单位：集美大学海洋食品与生物工程学院;福建省食品微生物与酶工程重点实验室;厦门市食品生物工程技术研究中心;厦门海洋职业技术学院海洋生物学院;
摘要：芸香糖苷类黄酮化合物的水解产物槲皮素、柚皮素、橙皮素具有丰富的生物活性和应用前景。为了探讨不同芸香糖苷酶水解制备槲皮素、柚皮素和橙皮素的特性，选择了Aspergillus niger CBS 513.88的芸香糖苷酶AnRut,Acremonium sp. DSM 24697的αRβD Ⅰ和αRβD Ⅱ进行底物特异性和酶学性质的比较研究。结果表明，三种芸香糖苷酶均只能水解α-1,6连接的芸香糖苷类黄酮化合物，对α-1,2连接的新橙皮糖苷类黄酮化合物无作用。AnRut偏好水解3-O连接的芦丁，αRβD Ⅰ偏好水解7-O连接的芸香柚皮苷和橙皮苷，αRβD Ⅱ对两种类型底物都具有良好的水解活性。分子对接结果表明三种酶与芦丁、芸香柚皮苷和橙皮苷的结合模式不同，三种酶与底物的苷元结构的相互作用差异影响了底物特异性。AnRut最适温度50℃，最适pH4.0,10 mmol/L的β-ME和DTT对AnRut酶活有明显促进作用，相对酶活是未处理酶的223%和242%。αRβD Ⅰ最适温度70℃，最适pH4.0，在酸性条件下对芸香柚皮苷和橙皮苷具有良好的水解活性。αRβD Ⅱ最适温度40℃，最适pH6.0，较适用于中性条件下对三种底物的水解。本研究为应用不同芸香糖苷酶制备槲皮素、柚皮素、橙皮素以及芸香糖苷酶构效关系的后续研究提供了实验和理论依据。
关键词：芸香糖苷酶;;芸香糖苷类黄酮;;底物特异性;;酶学特征;;分子对接
基金资助：国家自然科学基金项目（32170056）
