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作者：冉凯旋;荀明强;林凯欣;付育;王丽丽;张春晓;仪宏;
单位：河北科技大学食品与生物学院;
摘要：为开发新的热稳定性高的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶，本研究对肠道益生菌Blautia wexlerae基因组进行挖掘，对疑似D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因在枯草芽孢杆菌中进行表达，应用高效液相色谱鉴定表达蛋白功能，通过理性设计提高该蛋白热稳定性。结果表明，B. wexlerae糖磷酸异构酶基因具有D-阿洛酮糖-3-差向异构酶（DPE）功能，最适温度60℃，最适pH7.0，转化率27.1%±1.1%；突变体DPE(H283A)最适温度较野生型提高5℃，70℃下半衰期为30 min，较野生型半衰期延长10 min，转化率达30.6%±2.6%，较野生型提高3.5%。本研究挖掘并鉴定了B. wexlerae D-阿洛酮糖-3-差向异构酶，理性设计获得了热稳定性和酶活力均提高的突变体DPE(H283A)。
关键词：Blautia wexlerae;;D-阿洛酮糖-3-差向异构酶;;D-阿洛酮糖;;热稳定性;;理性设计
基金资助：河北省重点研发计划项目(21372802D);; 石家庄市科技计划项目(241490182A);; 河北省发酵技术创新中心开放科研课题(重点类)
