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作者：周岚;李宏彬;孙嫚;刁静静;曹荣安;王长远;
单位：黑龙江八一农垦大学食品学院;黑龙江八一农垦大学国家杂粮工程技术中心;
摘要：为了筛选黑豆蛋白中具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的肽段，采用双酶复合水解法酶解黑豆蛋白制备α-葡萄糖苷酶抑制肽，并通过超滤、液相色谱-串联质谱和分子对接技术对黑豆蛋白α-葡萄糖苷酶抑制肽进行分离、鉴定和筛选，最后验证其体外活性。结果表明，利用中性蛋白酶酶解180 min后再用碱性蛋白酶酶解180 min，制得的黑豆蛋白酶解物，在浓度为2 mg/mL时对α-葡萄糖苷酶抑制率为45.81%±0.51%。酶解物经超滤后，其中Ⅰ组（<1 kDa）浓度为2 mg/mL时，α-葡萄糖苷酶抑制率高达81.29%±1.11%。在Ⅰ组分中鉴定并筛选出了1条溶解性好、无毒、无致敏性且未曾被报道过的α-葡萄糖苷酶抑制肽KGLF(Lys-Gly-Leu-Phe)，该肽与α-葡萄糖苷酶的对接结合能为-3.69 kcal/mol，经体外验证其IC_(50)值为5.26×10_(-3) mg/mL，显著低于黑豆蛋白酶解液Ⅰ组（P<0.05）。综上，本研究通过双酶复合水解黑豆蛋白成功制备并筛选高活性降糖肽，可以为黑豆深加工和制备高附加值的功能性产品提供理论依据。
关键词：黑豆蛋白;;α-葡萄糖苷酶抑制肽;;液质联用;;分子对接;;功能特性
基金资助：黑龙江省重点研发计划项目（2022ZX02B18）;; 中央引导地方项目（ZY23QY16）
