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作者：李欣;张秋涵;马子尧;关波;胡有贞;李谞;倪永清;
单位：农业农村部特色农产品加工与质量安全控制重点实验室(部省共建),石河子大学食品学院;兵团食品营养与安全控制重点实验室,石河子大学食品学院;
摘要：为了给益生性低聚半乳糖(GOS)的合成提供新的乳酸菌酶源，本研究从新疆传统奶酪中筛选具有高转糖苷活性的β-半乳糖苷酶产酶菌株。在以乳糖为单一碳源的MRS固体培养基中加入显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal)，以菌落生长颜色进行初筛，以粗酶液酶活性以及转糖苷反应混合物的薄层色谱(TLC)进行复筛，结合其形态学、生理生化特征及16S rRNA序列同源性分析对产转糖苷活性的β-半乳糖苷酶菌株进行鉴定。单因素实验确定菌株的产酶条件和粗酶液的转糖苷反应条件，高效液相色谱分析转糖苷反应产物的组分及含量。筛选获得产转糖苷活性β-半乳糖苷酶的菌株6株，其中Pediococcus acidilactici Y1的产酶水平和转糖苷活性最高。单因素实验结果表明，P. acidilacticiY1在20mg/mL乳糖，37℃培养18h时，产酶水平最高可达(15.52±0.34)U/g。在初始乳糖浓度300 mg/mL，加酶量4.24 U/mL,50℃反应28 h时，GOS得率最高为38.4%±0.56%(w/w)，乳糖残留量为30.9%±0.44%(w/w)。其中转移二糖、转移三糖以及转移四糖的质量分数分别为15.6%±0.21%(w/w)、18.3%±0.15%(w/w)和4.5%±0.01%(w/w)。以上结果表明，P. acidilactici Y1是一株产转糖苷活性β-半乳糖苷酶的新菌株，在益生性GOS的合成领域具有应用前景。
关键词：半乳糖苷酶;;转糖苷活性;;低聚半乳糖;;乳酸片球菌;;奶酪
基金资助：国家自然科学基金（32060522）;; 兵团科技创新人才计划青年拔尖人才项目（2024DB028）;; 石河子大学成果转化与技术推广计划（CGZH202305）
