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作者：秦一彤;余娧凡;钱旭;姚云君;金磊磊;陈集双;虞龙;
单位：南京工业大学生物与制药工程学院;遵义医科大学,生物资源健康利用研究中心;
摘要：石斛碱是传统植物金钗石斛(Dendrobium nobile)的特征药用活性成分，结构上属于石斛型生物碱(dendrobine-type total alkaloids, DTTAs)。石斛碱的积累受周期和环境的影响，仅从植物中获取难以满足需求。该研究的对象Trichoderma longibrachiatum UN32是实验室前期通过复合诱变获得的产DTTAs的正突变株。为提高UN32的生物碱产量，使产物表达水平趋于稳定，该研究从UN32发酵培养基中无机盐的添加量出发，利用响应面法确定金属离子的最优配比。根据Plackett-Burman法设计筛选出对响应结果影响程度最显著的3个因素分别为Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+),其最佳添加时间和添加浓度分别是Cu~(2+) 0.5 mmol/L(第6天)、Fe~(2+) 0.4 mmol/L(第6天)和Zn~(2+) 0.7 mmol/L(第3天)。响应面统计的结果显示，当模型响应值生物碱量达最大值时，Cu~(2+)、Zn~(2+)和Fe~(2+)的浓度分别为0.54、0.69、0.39 mmol/L,此时生物碱产量达到(317.36±6.48)μg,比初始培养基提高了72.68%。综上，金属离子及其不同组合对菌株UN32生物碱的积累具有促进作用，该方法具有较好的开发价值和应用前景。
关键词：长枝木霉;;内生真菌;;石斛型生物碱;;金属离子;;响应面优化
