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作者：李欣颖;张善飞;刘旻炜;黄子瑄;孙付保;
单位：江南大学生物工程学院;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室;
摘要：肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域，但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期整合表达莫能菌素生物合成基因簇中途径特异性正向调控基因(monH、monRⅡ)基础上，尝试通过异源整合表达透明颤菌血红蛋白基因vgb,以期通过改善菌株摄取溶氧能力来提高莫能菌素产量。结果显示，在40 mmol/L Ca~(2+)、供受体菌比例100∶1和培养18 h覆盖抗生素条件下，接合转移效率提高3倍；成功将基因vgb与莫能菌素生物合成途径特异性调控基因monH/monRⅡ进行串联整合，得到工程菌2110-monH-vgb和2110-monH-monRⅡ-vgb,其摇瓶生物量在高限氧条件下稍有提高(6%),但发酵效价分别较异源表达前提高18.0%和21.3%;后者在5 L罐水平生物量较异源表达前略有提高，发酵效价高达11.5 kU/mL,较出发菌提高47.3%。通过优化遗传操作系统并用于肉桂地链霉菌发酵产莫能菌素基因工程改造，成功获得有效提高莫能菌素发酵效价的vgb异源串联整合表达菌，为其后续的工业应用奠定基础。
关键词：肉桂地链霉菌;;莫能菌素;;接合转移;;异源表达;;透明颤菌血红蛋白基因vgb
基金资助：国家自然科学基金面上项目(22278189)
