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作者：刘汉焱;缪礼鸿;杜薇;张恩华;刘蒲临;
单位：武汉轻工大学生命科学与技术学院;
摘要：该研究通过信号肽筛选和启动子优化构建了一种在枯草芽孢杆菌中高效分泌嗜碱碱性卤杆菌蛋白酶的表达系统。结果表明，信号肽筛选和启动子优化的组合策略显著提高了该蛋白酶在枯草芽孢杆菌中的胞外表达量。在173种信号肽中，SP_(Ydjm)介导该蛋白酶分泌的效率最高，是原始信号肽SP_(aprE)所介导酶活力的13.8倍。而串联启动子P_(HapII)-P_(ylb)对表达的促进作用最为显著，使酶活力进一步提升1.7倍。经发酵培养基适配，该表达系统在摇瓶中产生的蛋白酶活力为18 600 U/mL。进一步使用5 L发酵罐发酵后，酶活力达到34 050 U/mL。该表达体系有效的提升了嗜碱碱性卤杆菌蛋白酶的分泌量，为该酶的生产与应用提供了良好的基础。
关键词：枯草芽孢杆菌;;蛋白酶;;串联启动子;;信号肽
基金资助：国家重点研发计划(2021YFC2100202)
