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作者:刘瑜;张鑫鑫;王睿;孟祥红;
单位:中国海洋大学食品科学与工程学院;
摘要:为开发可用于食品领域的新型嘌呤降解酶,本研究采用反向虚拟筛选技术和分子对接技术,筛选具有潜在嘌呤降解活性的酶,对该酶进行克隆表达、纯化及活性验证,并探究其降解嘌呤的最优反应条件。结果表明,由反向虚拟筛选平台PharmMapper筛选得到的二氢乳清酸酶和腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤的对接结合能分别为-7.3、-6.9、-7.6、-8.8 kcal/mol,对接结果最好。经克隆表达获得分子量为41 kDa的二氢乳清酸酶,其催化鸟嘌呤降解的最适条件为pH8.0,25℃,在Zn~(2+)(0.5 mmol/L)催化下,可降解46.1%的鸟嘌呤。因此,本研究发现二氢乳清酸酶具有一定的鸟嘌呤降解活性,并确定了其降解鸟嘌呤的最佳反应条件,为其在食品嘌呤降解中的应用奠定基础。
关键词:反向虚拟筛选;;分子对接;;克隆表达;;鸟嘌呤;;降解
基金资助:“十四五”国家重点研发计划重点专项(2021YFD21005)