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作者:舒欣;孟维洪;谢文静;张东杰;王鹤霖;富天昕;庄柯瑾;
单位:黑龙江八一农垦大学食品学院;国家杂粮工程技术研究中心;黑龙江省农产品加工与质量安全重点实验室;
摘要:为了探究黑豆-乳清双蛋白(Black soybean-Whey blended Protein,B-WP)对大鼠十二指肠屏障损伤和肝损伤的保护作用机制,本研究选用低、中、高剂量B-WP喂食大鼠28 d,最后一天腹腔注射2.5 mg/kg脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)。采用酶联免疫试剂盒检测十二指肠组织中的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平,Western Blot检测十二指肠中NF-κB p65、NF-κB p-p65、JAK2和STAT3的蛋白表达水平,并通过HE染色、酶联免疫法和实时荧光定量PCR对检测肝脏的组织形态、谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)含量以及Toll样受体4(Toll-like Receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(Myeloid Differentiation Primary Response protein 88,MyD88)基因mRNA表达进行分析。结果表明:LPS会引起十二指肠氧化应激,激活NF-κB/JAK2/STAT3通路和肝损伤,进而造成十二指肠屏障损伤;低、中、高剂量B-WP膳食干预均能够调节氧化应激,其中中剂量膳食干预效果最为显著(P<0.01),具体表现为MDA含量减少34.93%,SOD活力提高61.16%,GSH含量增加48.48%;不同剂量B-WP膳食干预均能够下调NF-κB p65、NF-κB p-p65、JAK2和STAT3的蛋白含量,中剂量膳食干预效果最好,使NF-κB p65、NF-κB p-p65、JAK2和STAT3蛋白含量显著降低35.06%、42.53%、45.88%和44.32%(P<0.01);不同剂量的B-WP膳食对肝损伤程度均有所改善,以中剂量膳食干预效果最为显著(P<0.01),使ALT和AST水平分别降低47.07%和41.79%,TLR4和MyD88的m RNA含量分别降低48.87%和45.46%。综合来看,B-WP对LPS诱导的十二指肠屏障损伤的保护作用可能是通过调节氧化应激、抑制NF-κB/JAK2/STAT3通路的活化和改善肝损伤来实现,并且中剂量B-WP膳食的保护效果最佳。
关键词:黑豆-乳清蛋白;;十二指肠屏障;;氧化应激;;NF-κB/JAK2/STAT3通路;;肝脏
基金资助:国家重点研发计划项目(2023YFD1202705-6);; 黑龙江省杂粮生产与加工优势特色学科项目(2022-78);; 黑龙江省“优秀青年教师基础研究支持计划”资助项目(YQJH2024168);; 黑龙江省自然科学基金资助项目(LH2024C087)