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食品与发酵工业2024年第04期:低温β-1,4-内切葡聚糖酶的基因挖掘、异源表达及其酶学性质表征

来源:期刊VIP网 时间:


作者:圣弟青;钮成拓;闫亚楠;郑飞云;刘春凤;王金晶;李崎;

单位:工业生物技术教育部重点实验室(江南大学);

摘要:β-1,4-内切葡聚糖酶在洗涤行业有着广泛的应用价值,其中具有较好的低温和碱性耐受能力是其实现工业应用的重要前提。该论文通过基因挖掘获得一株具有低温耐受能力的Deinococcus cellulosilyticus来源新型β-1,4-内切葡聚糖酶基因EgDC,并将其在大肠杆菌中实现了可溶性表达,其中大部分存在于周质空间,少部分分泌至胞外。对EgDC酶的酶学性质进行了表征,发现该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和pH 6.5,其在20℃能保持70%以上活力,且在pH 8.0和pH 9.0的半衰期分别达到83.43 min和53.79 min。EgDC酶具有较好的催化性质,其比酶活力k_(cat)/K_m值分别为(26.38±1.43) U/mg和(520.03±17.07) s~(-1)/mg,且对于金属离子以及表面活性剂均具有较强耐受能力。由此可见,新型β-1,4-内切葡聚糖酶EgDC具有较好的催化能力,且在低温、碱性以及存在表面活性剂环境下较为稳定,因此具有潜在的工业应用价值。

关键词:基因挖掘;;β-1,4-内切葡聚糖酶;;异源表达;;酶学性质;;低温;;耐碱性

基金资助:国家重点研发计划子课题(2021YFC2100404)