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作者：王妍凌;陈杉彬;赵文梅;尹丽萍;黎进雪;张海鹏;张金萍;黄翠;吕嘉伟;武运;薛洁;
单位：新疆农业大学食品科学与药学学院;中国食品发酵工业研究院有限公司;国家酒类品质与安全国际联合研究中心;
摘要：为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响，该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B light chain3,LC3)和螯合体1(sequestosome 1, P62)的水平变化，初步评估新疆葡萄酒中酚类物质对LO2细胞自噬的影响作用。免疫印迹结果发现，橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯，可显著提升LO2细胞中LC3蛋白的表达水平，提示橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯或对LO2细胞自噬活性有一定影响作用。进一步通过实时荧光定量方法观察橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯对LC3和P62蛋白mRNA的影响作用发现，橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理细胞后，显著上调了LC3蛋白的mRNA水平，同时降低了P62蛋白的mRNA水平；细胞免疫荧光染色显示橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理LO2细胞后，绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)和红色荧光蛋白(red fluorescent protein, RFP)标记的LC3蛋白荧光强度增强，提示细胞内形成自噬小体；流式细胞术结果进一步发现，GFP-LC3/RFP-LC3荧光强度比值减小，表明自噬小体成熟。综上所述，橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯对LO2细胞自噬活性具有一定的促进作用，但其作用机理尚需要进一步深入研究。
关键词：新疆葡萄酒;;细胞自噬;;酚类物质;;肝脏保护;;LO2细胞
基金资助：新疆维吾尔自治区重大科技专项(2022A02002-2)
