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作者：单逸蓝;杨梦莲;赵琳;沈微;杨海泉;夏媛媛;陈献忠;
单位：江南大学工业生物技术教育部重点实验室;安徽华恒生物科技有限公司;
摘要：该文旨在通过更换纤维素结合结构域(cellulose binding domain, CBD)的方式探索获得具有纤维素水解能力的耐热型葡聚糖酶的方法。黑曲霉(Aspergillus niger)来源的葡聚糖酶AnEglA6具有优越的耐热性能，在禽类饲料生产中具有应用前景。通过更换不同家族来源的碳水化合物结合结构域(carbohydrate binding module, CBM)编码区，构建了融合体葡聚糖酶基因，分别在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中进行异源表达。AnEglA6催化结构域与分别来源于嗜热菌(Caldicellulosiruptor kristjanssonii)和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的木聚糖酶的底物结合结构域CBM9、CBM10结合获得的融合体酶AnEg-CBM9和AnEg-CBM10均具有较高的纤维素水解能力，并且底物范围进一步扩大，对微晶纤维素也具有一定的水解能力。AnEg-CBM10热稳定性有显著的提高，在85℃下酶活力半衰期达到40 min左右，能短时耐受90℃高温。融合体酶AnEg-CBM10是一种热稳定性提高、具有纤维素水解能力的新型葡聚糖酶。
关键词：葡聚糖酶;;热稳定性;;底物结合结构域;;CBM9;;CBM10
基金资助：国家重点研发项目(2022YFC2104602)
