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作者：刘成川;金红星;
单位：河北工业大学化工学院;
摘要：甘露醇是一种具有多种功效的六糖醇，被广泛应用于医药、食品、化工和电子等行业。为构建高产甘露醇的明串珠菌，建立了将底盘细胞转化为高产目标产物菌株的理论：细胞工厂的“源-库”学说。通过2次同源重组，打破染色体中基因的操纵子和重叠基因模式，并将甘露醇外排泵蛋白(mannitol efflux pump, MEP)基因序列和再生NADH的酶(甲酸脱氢酶)基因序列定点插入到染色体上。蔗糖为90 g/L时，打破mep基因的操纵子和重叠基因模式的菌株甘露醇产量比原始菌株(CGMCC1.10327)提高了9.5%。原始菌株染色体上敲入一个拷贝mep基因序列的菌株，底物蔗糖能添加到120 g/L,甘露醇产量也达到55.18 g/L。CCTCC M2020762菌株染色体上敲入一个拷贝甲酸脱氢酶基因序列的菌株，底物蔗糖能添加到145 g/L,甘露醇产量也达到101.6 g/L。使细胞工厂具备更强的“源”能(NADH再生等)和更大的“库”容(提高MEP活性),实现目标产物的超高产。
关键词：细胞工厂;;源-库;;明串珠菌;;甘露醇;;发酵;;合成生物学
