来源:期刊VIP网 时间:
作者:魏雨;李由然;石贵阳;
单位:江南大学,粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心;江南大学生物工程学院;
摘要:该研究首次在地衣芽孢杆菌中异源表达溶纤瘤胃杆菌H10来源的D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase, DPE),开拓D-阿洛酮糖生物合成法又一新的表达载体途径。首先,选取不同启动子介导表达该酶,选取表达效果最好的重组菌BL1进行全细胞转化条件和发酵条件的优化。利用优化后的重组菌全细胞转化条件,65℃、反应体系细胞OD_(600)值为2、反应10 min、底物D-果糖100 g/L探索出发酵培养条件,碳源为蔗糖75 g/L、初始pH 7.5、37℃,最终利用全细胞转化方法,65℃、500 g/L D-果糖、反应体系细胞OD_(600)值为30、反应20 min,转化率达30.3%,D-阿洛酮糖产量可达120 g/L,单位酶活力达到33.3 U/mL。采用分4次添加与果糖摩尔质量比为0.4的硼酸至反应体系中的方法,将转化率提高至69.8%。该研究为工业生产D-阿洛酮糖提供一定的参考价值。
关键词:D-阿洛酮糖;;地衣芽孢杆菌;;全细胞转化;;D-阿洛酮糖3-差向异构酶;;异源表达;;启动子
基金资助:国家重点研发计划项目(2020YFA0907704);; 国家自然科学基金项目(32172174)