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作者:姚巧儿;张英;王永红;
单位:华东理工大学,生物反应器工程国家重点实验室;
摘要:该研究对于产碱性蛋白酶地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的合成培养基进行了系统的筛选与优化。基于豆粕成分分析及文献报道构建初始化学合成培养基CDM_0,并通过单一组分移除实验,初步确定对菌体生长有显著影响(生长降低20%以上)的组分,包括3种碱基、4种维生素、11种氨基酸以及一些金属离子和无机盐。在此基础上进行了组分添加实验,分别添加单一组分移除实验从CDM_0中剔除的组分,进而筛选出对菌体生长具有20%以上促进作用的5种关键营养物质,并用全排列方法得到了26种组合添加方式,经实验确定了添加的最佳组合为(NH_4)_2SO_4、腺嘌呤和天冬酰胺。此外,还研究了甘油、5种单糖和3种双糖对菌体生长及碱性蛋白酶合成的影响,最终以半乳糖为碳源确定了一种优化后的化学全合成培养基CDM_3。实验结果表明,与CDM_0相比,CDM_3显著提高了菌体的生长速率和碱性蛋白酶的产量,其中酶活力提升至10 300.7 U/mL,提高了约2.5倍。该实验结果为今后研究该菌株的代谢特性奠定了基础。
关键词:地衣芽孢杆菌;;碱性蛋白酶;;化学合成培养基;;筛选优化;;碳源
基金资助:国家重点研发计划(2021YFC2100205)