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作者:程一晗;李翔飞;韩如梦;刘艳;薛正莲;
单位:安徽工程大学生物与食品工程学院;安徽省工业微生物分子育种工程实验室;
摘要:新霉素主要是由弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵生产的一种氨基糖苷类抗生素,广泛应用于医药、畜牧等领域,能够有效地控制和治疗细菌引起的疾病,提高畜禽的生长速度和生产性能。为了提高新霉素产量,该研究通过比较转录组学分析原始弗氏链霉菌SF-1和诱变高产菌SF-2的转录组数据,挖掘出转录水平差异显著的转录因子,然后过表达构建重组质粒,再通过接合转移构建出工程菌株。经摇瓶发酵验证筛选出对新霉素合成影响显著的工程菌株,进行启动子优化最终得到高产的生产新霉素工程菌株SF-2/pP-NeyR。随后对发酵培养基组分进行正交优化,最终新霉素B效价为11 843 U/mL。综合优化后新霉素B的效价较初始提高了29.6%。该实验结果为新霉素后续代谢机理研究、其和弗氏链霉菌新霉素合成基因簇的相互作用研究、解析调控新霉素合成机理奠定了基础,为进一步提高新霉素效价提供了思路。
关键词:弗氏链霉菌;;新霉素;;比较转录组学;;转录因子;;启动子优化;;发酵优化
基金资助:国家自然科学基金项目(32300059);; 安徽省博士后研究人员科研活动经费资助项目(2023B692)