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作者：于飞;吴彤;冯玉超;富天昕;张舒;王长远;
单位：黑龙江八一农垦大学食品学院;国家杂粮工程技术研究中心;
摘要：本研究以绿豆为原料，通过提取不同煮制时间处理的多酚，测定多酚含量、抗氧化活性及单体酚组成。采用逆转录-聚合酶链反应RT-PCR和Western blotting等技术深入探究了煮制加工绿豆提取多酚对热应激诱导的细胞凋亡的影响机制。结果显示，煮制25 min的绿豆具有较高的多酚含量(16.017 mg/g)和抗氧化活性(DPPH:90.733%;ABTS~+:89.997%;T-AOC:90.423 U/mL)，可用于后续实验；与热应激组(Heat stress,HS)相比，煮制25 min绿豆提取多酚能够显著抑制热休克蛋白(Hsp27、Hsp70、Hsp90)的mRNA(1.336、1.319、1.354)及凋亡蛋白表达(Bax:1.212)(P<0.05)，降低细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量，绿豆多酚预防组(Mung bean polyphenol prevention group,Pro-mbp:157.96%)，绿豆多酚缓解组(Mung bean polyphenol remission group,Rem-mbp:163.48%)；与Rem-mbp相比，Pro-mbp BCL-2(0.976)和Bcl-2(0.696)表达升高，CYCS(1.323)、CASP3(1.496)和PARP1(1.208)及相关蛋白质表达降低，表明煮制25 min的绿豆提取多酚对热应激的预防作用大于缓解作用。煮制25 min绿豆提取多酚通过降低细胞内ROS含量，调节HSP27(HS:1.015,NAC(ROS抑制剂)：0.832,Pro-mbp+NAC:0.482,Rem-mbp+NAC:0.697)、HSP70(HS:1.013,NAC:0.856, Pro-mbp+NAC:0.497, Rem-mbp+NAC:0.732)、 HSP90(HS:1.016, NAC:0.873, Pro-mbp+NAC:0.501,Rem-mbp+NAC:0.726)的表达，证实热应激诱导的细胞凋亡与Caspase介导的线粒体通路有关，从而抑制热应激诱导的细胞凋亡。本研究为后续探究煮制加工绿豆提取多酚调控热应激的相关通路提供理论依据。
关键词：绿豆多酚;;煮制时间;;热休克蛋白;;ROS;;细胞凋亡
基金资助：黑龙江省“双一流”学科协同创新成果项目（LJGXCG2023-019）
