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作者：杨行;张文姣;闫协民;赵伟;江正强;闫巧娟;杨绍青;
单位：中国农业大学工学院;中国农业大学食品科学与营养工程学院;山东福洋生物科技股份有限公司;
摘要：目的：发掘耐热木聚糖酶并探究其在麦芽糖化中的应用潜力。方法：克隆嗜热拟青霉(Paecilomyces thermophila)J18木聚糖酶(PtXynA)基因，将其在黑曲霉中进行异源表达，在5 L发酵罐中采用液体深层发酵制备重组酶(PtXynA)，进一步探究酶的酶学性质，最后评价重组酶在麦芽糖化中的应用效果。结果：重组菌经液体深层发酵96 h后，木聚糖酶的酶活力达到904.0 U/mL，蛋白含量为1.4 mg/mL。重组酶在pH7.0和70℃下表现出最高酶活力，在pH5.5～9.0和75℃以下保持稳定。PtXynA显示出严格的底物特异性，对小麦阿拉伯木聚糖(1993.2 U/mg)的比酶活力最高，其次为燕麦木聚糖(1782.5 U/mg)、榉木木聚糖(1552.0 U/mg)和桦木木聚糖(1238.7 U/mg)。在麦芽糖化过程中添加木聚糖酶(200 U/g麦芽)，麦芽汁的过滤时间和黏度分别降低了43.9%和10.8%。结论：PyXynA具有优良的酶学特性，在啤酒糖化过程中显示出较大应用潜力。
关键词：嗜热拟青霉;;异源表达;;嗜热木聚糖酶;;阿拉伯木聚糖酶;;麦芽糖化
基金资助：国家重点研究计划（2022YFC2104900）
