来源：期刊VIP网 时间：
作者：成卓;刘国玉;中西秀树;
单位：江南大学生物工程学院;中国食品发酵工业研究院有限公司,功能主食创制与慢病营养干预北京市重点实验室;
摘要：在酿酒酵母孢子中，存在糖酵解产物3-磷酸甘油醛(3-glyceraldehyde phosphate, GAP)参与的抑制萌发的负调节机制，但是目前的调控途径并不完善。该研究目的是发现GAP对萌发孢子的影响，并深入了解其负调控机制。重点分析以GAP为底物的糖酵解酶——三磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)在调控机制中的作用。该文采用富营养培养基和热处理等多种条件诱导酵母孢子萌发，并通过荧光增白剂染色来测定萌发率。分别在有无GAP的条件下诱导萌发，研究GAPDH的表达水平。接着利用qPCR的方法检验GAPDH mRNA的表达水平。此外，在酵母中敲除TDH1、TDH2和TDH3这3个GAPDH的结构基因，分析突变体的萌发效率。结果显示当营养物诱导或加热处理促使孢子萌发时，GAPDH的表达水平显著降低，而在孢子萌发的过程中添加GAP反而会增加GAPDH水平。qPCR结果显示孢子萌发时GAPDH的mRNA水平没有降低，故GAPDH表达水平的降低是因为在萌发过程中蛋白被降解。且GAPDH单个结构基因的缺失会增加孢子的萌发率。结果表明GAPDH参与GAP介导的负调控机制。
关键词：静止期细胞;;酵母;;三磷酸甘油醛脱氢酶;;孢子;;萌发
基金资助：国家自然科学基金(32071467)
