来源:期刊VIP网 时间:
作者:吴涵;毛银;周胜虎;邓禹;
单位:江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心;江南大学生物工程学院;
摘要:α-熊果苷是二十一世纪理想的皮肤美白祛斑活性剂。当前,α-熊果苷的合成主要依赖酶催化或微生物发酵,由于产品价格昂贵,市场供不应求。因此,进一步提高α-熊果苷的产量有望降低生产成本和产品价格。该研究通过在大肠杆菌中异源表达肠膜明串珠菌的蔗糖磷酸化酶(sucrose phosphorylase, SPase),实现了全细胞催化产α-熊果苷的目标。随后,系统地分析了诱导温度、培养基类型、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, IPTG)浓度、诱导OD_(600)、接种量及诱导后培养时间对SPase的酶活性和表达水平的影响。在最佳产酶条件下全细胞催化显著提高了α-熊果苷的产量,总产量达到158.8 g/L,转化率为86.8%。为进一步提高全细胞催化次数,建立了固定化细胞技术并优化了催化过程参数,最终在14次循环催化后累计产量达到323.9 g/L,为α-熊果苷的工业化生产提供了技术参考。
关键词:α-熊果苷;;蔗糖磷酸化酶;;大肠杆菌;;固定化细胞技术;;对苯二酚
基金资助:国家重点研发计划项目(2022YFA0911800);; 江苏省杰出青年基金项目(BK20220089)