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作者：杜婧玮;王蕾;张定坤;魏贝贝;陈世恒;吴敬;陈晟;
单位：江南大学生物工程学院;江南大学,食品科学与资源挖掘全国重点实验室;江南大学,教育部食品安全国际合作联合实验室;
摘要：难消化糊精是一类富含α-1,2、α-1,3、α-1,6糖苷键或环状糖链结构的可溶性糊精的总称，具有升糖指数低及促进肠道益生菌增殖的特点。难消化糊精的目前商业化主流制备工艺为酸热法，酶法制备相关研究仍然较少。难消化糊精制备的关键是增加难消化的α-1,2、α-1,3、α-1,6糖苷键含量或增加产物聚合度。对构巢曲霉(Aspergillus nidulans)来源的α-葡萄糖苷酶AgdB进行改造，以增加其产物α-1,3键型或提高其产物聚合度。通过理性设计，经定点突变后获得N466D、R450H、A445S、Y202A共4个突变体。以麦芽糖为底物反应时，突变体N466D、R450H产物α-1,3糖苷键含量增加，突变体R450H、A445S、Y202A生成更高聚合度的产物。随后将突变体与野生型分别与环糊精葡萄糖基转移酶进行复配，结果表明，突变体R450H、A445S、Y202A均能有效提高产物慢消化成分，突变体N466D虽然提高了α-1,3键含量，但同时提高了α-1,4键含量，因此产物慢消化成分反而有所降低。该研究为改造α-葡萄糖苷酶，提高难消化糊精的慢消化及抗消化组分提供了新的思路。
关键词：α-葡萄糖苷酶;;难消化糊精;;分子改造;;体外消化
基金资助：国家自然科学基金青年科学基金项目(32001637);国家自然科学基金面上项目(31972032);; 江苏省自然科学基金面上项目(BK20221536);; 中央高校基本科研计划(青年基金项目)(JUSRP122010)
