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作者:王志华;赵一鸣;任文洁;王玉龙;李一帆;曾峻涛;何保山;
单位:河南工业大学粮油食品学院,河南工业大学国家工程实验室,省重点实验室;江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所;
摘要:呕吐毒素(deoxynivalenol, DON)对人类和动物的健康以及食品经济构成了极大的威胁。该研究建立一种基于金纳米花(gold nanoflowers, AuNFs)的免疫层析试纸条(immunochromatographic test strip, ICTS)快速检测玉米中的呕吐毒素的方法。采用种子生长法制备了AuNFs,将其与抗DON单克隆抗体结合制备免疫层析试纸条中的金标探针,并对pH值、抗体量、上样缓冲液浓度、检测线(test-line, T线)浓度和金标探针量进行优化,最终用于玉米中的DON检测。经过优化实验条件,确定了最优pH值为7.5,最佳抗体添加量为1μL,最适上样缓冲液浓度为PBST+1%PVP K30,最好的T线质量浓度为0.1 mg/mL以及最佳探针量为3μL。在最优反应体系下,实验结果可以通过肉眼观察进行定性分析,该方法检出限为20μg/kg,灵敏度≥99%、假阳性率≤1%、假阴性率≤1%,且与现有标准方法检测结果一致,同时与其他真菌毒素无交叉反应。以AuNFs标记抗体为探针制备的ICTS灵敏度高,特异性强,可以实现玉米中DON的快速检测。
关键词:金纳米花;;种子生长法;;免疫层析试纸条;;快速检测;;呕吐毒素
基金资助:国家重点研发计划项目(2023YFF1104600);; 河南省科技研发联合基金(225200810066);; 新疆农垦科学院重大科技项目(NCG202408)