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作者:郑佳敏;付振浩;张乐乐;何雨铠;詹锦铃;刘春立;刘秀霞;杨艳坤;李业;白仲虎;
单位:江南大学生物工程学院;江南大学,粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心;无锡源清天木生物科技有限公司;
摘要:色醇是色氨酸的一种衍生物,因其存在的吲哚结构,可作为许多医药分子的关键中间体。目前色醇的工业生产方式全部为化学合成,生物法从头合成色醇的研究较少。且由于色醇较为复杂的合成代谢途径,单菌株平台进行代谢工程操作的工作量和难度较大,且多重基因改造容易给底盘菌株带来代谢负担。该研究采用共培养的方式,将色醇的合成代谢途径分为2个模块,分别由大肠杆菌和酿酒酵母承担,负责从碳源合成色氨酸和将色氨酸转化为色醇。最终通过在大肠杆菌BL21内过表达trpEDCBA,aroG与serA构建色氨酸生产菌株t12,酿酒酵母BY4741内过表达ARO9、ARO10、SFA1构建色醇生产的菌株yBL_965,2株菌构成的微生物群落在经过初始接种比例和接种量优化后,在5 L补料分批发酵中可合成色醇0.23 g/L。该研究方法和成果为生物法从头合成色醇及其他芳香族氨基酸衍生物提供了思考方向和参考依据。
关键词:微生物群落;;共培养;;色醇;;代谢工程;;大肠杆菌;;酿酒酵母
基金资助:教育部工业生物技术重点实验室开放课题(KLIB-KF202201);; 国家自然科学基金面上项目(21878124)