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作者：张巧;李永成;
单位：食品科学与工程学院(海南大学);食品科学与工程技术研究院(贺州学院);
摘要：几丁质脱乙酰酶(chitin deacetylase, CDA)是几丁质生物转化为壳聚糖的关键酶。然而，目前报道的高活性CDAs非常少。为了获得高效的CDA,并提高其对几丁质的生物转化效率，该研究对来源于Rhizopus stolonifer中的CDA进行基因克隆、表达及纯化，获得几丁质脱乙酰酶RsCDA1,研究其酶学性质并探究其与来源于Vibrio harveyi的几丁质酶VhChit2对几丁质的协同水解作用。结果表明，RsCDA1的比酶活力为5.2 U/mg,在45℃、pH 6.5条件下活性最高，在温度低于40℃、pH 6.5～8.0保持较好的稳定性。1 mmol/L的Ca~(2+)、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Ba~(2+)和Co~(2+)对RsCDA1的活力有促进作用；1 mmol/L的Ni~(2+)和Cu~(2+)对该酶有抑制作用。此外，RsCDA1与VhChit2在几丁质水解中表现出良好的协同降解和脱乙酰作用。RsCDA1与VhChit2(摩尔浓度比为10∶1)在50℃、pH 6.5条件下水解20 mg/mL几丁质2 h时，对几丁质酶和CDA的协同度分别达到120.3%和175.6%。与单独使用RsCDA1相比(27.5%),两者协同水解时几丁质的脱乙酰度增加到35.3%。因此，RsCDA1在几丁质的生物转化中具有潜在的应用前景。
关键词：几丁质脱乙酰酶;;几丁质;;壳聚糖;;协同作用;;脱乙酰度
基金资助：海南省科技专项资助(ZDYF2022XDNY147)
