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食品与发酵工业2024年第13期:大肠杆菌L-丝氨酸脱水酶的表达改善甘氨酸营养缺陷型毕赤酵母L-丝氨酸的生长

来源:期刊VIP网 时间:


作者:刘璐瑶;李康;王世杰;白仲虎;杨艳坤;金坚;

单位:工业生物技术教育部重点实验室(江南大学);粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心(江南大学);江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心;江南大学生命科学与健康工程学院;

摘要:氨基酸作为一种迟效碳源无法被微生物快速利用。L-丝氨酸脱水酶(L-serine dehydratase,L-SerDH)可以将L-丝氨酸一步催化为丙酮酸和氨进入中心碳代谢生成生物量,且此过程不需要消耗ATP和还原力。L-丝氨酸是甲酸利用途径(还原性甘氨酸途径)的关键中间体。因此,改善L-丝氨酸的利用可以为甲酸和丝氨酸作为碳源利用提供参考价值。该文对巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)进行了丝氨酸耐受性实验,结果显示毕赤酵母可以耐受20 g/L丝氨酸。对内源L-丝氨酸脱水酶在毕赤酵母中的表达进行了优化。在甘氨酸营养型毕赤酵母内分别表达了8种异源L-丝氨酸脱水酶,结果表示大肠杆菌tdcG基因编码的L-SerDH对丝氨酸利用改善效果最好,终OD_(600)提高至出发菌株的1.6倍。该研究验证了巴斯德毕赤酵母对L-丝氨酸的耐受性,并筛选得到了较优的L-丝氨酸脱水酶来源,为毕赤酵母的丝氨酸利用提供了更优的酶来源。

关键词:L-丝氨酸脱水酶;;巴斯德毕赤酵母;;丝氨酸耐受性;;甘氨酸营养缺陷型菌株;;L-丝氨酸

基金资助:国家自然科学基金项目(32370054)