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作者：张晗;尹子璐;王雅珣;李飞胜;郭庆彬;丁文涛;王昌禄;
单位：天津科技大学食品科学与工程学院;天津科技大学,食品营养与安全国家重点实验室;
摘要：为提高产D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-allulose 3-epimerase, DAE)工程菌在全细胞催化生产D-阿洛酮糖中的稳定性和重复利用性，降低D-阿洛酮糖生产成本，以沸石咪唑骨架-8(zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8)为材料对产DAE重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)进行固定化研究。通过乙酸锌、2-甲基咪唑与菌体共沉淀制备固定化细胞，利用扫描电子显微镜、傅里叶红外光谱和X射线衍射等手段进行表征，证明成功制备了ZIF-8包覆的固定化重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis-DAE@ZIF-8。利用正交试验优化制备条件，当Zn~(2+)与2-甲基咪唑摩尔浓度比为1∶4,菌体添加量15 g/L,低温静置1 h时，复合材料比酶活最高，达344.81 U/g,活性回收率为77.75%。B.subtilis-DAE@ZIF-8在60℃、pH值7.5下表现最佳，60℃下半衰期为10.75 h,为游离细胞的1.46倍。B.subtilis-DAE@ZIF-8具有较好的重复使用性，重复催化10批次后，酶活力残留45.67%,转化率达20.08%,研究结果为D-阿洛酮糖的高效生物转化提供了参考。
关键词：D-阿洛酮糖3-差向异构酶;;枯草芽孢杆菌;;细胞固定化;;沸石咪唑骨架;;D-阿洛酮糖
