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作者：樊朝悦;倪晔;刘思言;韩瑞枝;
单位：江南大学,工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院;
摘要：莱鲍迪苷A(rebaudioside A, RA)是从甜叶菊中提取的一类低热量甜味剂，被认为是理想的蔗糖替代品，但其令人不愉快的后苦味限制了其在食品领域的应用。对RA进行适度酶法糖基化被认为是减缓其后苦味有效的方法之一。环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glucosyltransferase, CGTase)是目前催化RA糖基化最常用的酶，其主要缺点是反应生成的产物复杂多样，尤其是长链糖基化产物的占比较高，严重影响了产物的口感和品质。该研究探索了不同来源的CGTase催化RA糖基化反应，选择转化率及短链产物特异性均较好的α-CGTase(来源于Paenibacillus macerans)进行研究。通过酶学性质研究及反应条件优化，获得最佳反应条件：以pH 6.0的PBS为反应介质，水溶性淀粉为糖基供体，底物质量比为RA∶水溶性淀粉=1∶1,加酶量25μg/mL,40℃下反应12 h可达平衡，RA的转化率最高达到74.8%,短链产物(RA-nG,n≤2)占总产物的占比为86.5%,较优化前提高了10%。因此，在此条件下可有效提高短链糖苷化RA的特异性，在甜菊糖苷的工业应用中具有更大的潜力。
关键词：莱鲍迪苷A;;甜菊糖苷;;糖基化;;环糊精葡萄糖基转移酶;;短链产物特异性
基金资助：国家重点研发计划项目(2021YFC2102700);; 国家自然科学基金项目(31871738)
