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作者:蔡宝红;张心钰;夏冰冰;吴元元;杨静文;张洪斌;
单位:合肥工业大学食品与生物工程学院;
摘要:右旋糖酐是由α-1,6键连接的葡萄糖聚合物,不同分子质量的右旋糖酐有不同的应用价值。右旋糖酐T2000是重均分子质量为2 MDa左右的葡聚糖,可以作为食品添加剂使用。作为介质可以分离血液中的各类蛋白,用于医学检测,是一种高端多糖产品。目前采用酶法定向合成右旋糖酐T2000的研究报道甚少。该文将来源于肠膜状明串珠菌0326的右旋糖酐蔗糖酶和来源于短杆菌的右旋糖酐酶通过连接肽进行连接,设计构建特异性融合酶,旨在达到一步法定向制备右旋糖酐T2000。并成功在大肠杆菌中得到表达,构建具有双酶活性的融合酶。研究结果得到,融合酶中右旋糖酐蔗糖酶的最适pH值是5.5、最适温度是30℃;融合酶中右旋糖酐酶的最适pH值是9.0、最适温度是50℃。以0.1 g/mL的蔗糖溶液作为底物,添加终酶活力为5 U/mL的融合酶,在25℃,120~180 r/min,反应24 h,分离纯化后成功得到重均分子质量为2 MDa左右的右旋糖酐,产率为32.6%。研究结果为高分子多糖的酶法定向制备提供了新的途径。
关键词:右旋糖酐;;融合表达;;右旋糖酐蔗糖酶;;右旋糖酐酶
基金资助:安徽省自然科学基金面上项目(2308085MC110)