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作者：宋志华;张雪雪;宋雨薇;周治国;俞梦艳;张涛;张越;钱立生;
单位：安徽科技学院生命与健康科学学院;安徽科技学院食品工程学院;
摘要：铜离子浓度是影响CotA漆酶在大肠杆菌中异源表达的重要因素。然而，对大肠杆菌表达细菌漆酶重组蛋白的发酵条件探索和优化研究较少。该文通过在培养过程中控制铜离子添加量，探究铜离子浓度对大肠杆菌重组菌及突变菌漆酶表达量的影响。重组CotA漆酶表达菌株在铜离子浓度为1 mmol/L时破碎液漆酶活性较高，达到约2 207 U/mL;突变细菌漆酶I421A表达菌株在铜离子浓度为1.5 mmol/L时破碎液漆酶活性较高，达到631 U/mL;突变细菌漆酶T466A表达菌株在铜离子浓度为1.5 mmol/L时破碎液漆酶活性较高，达到852 U/mL;突变细菌漆酶K464A表达菌株在铜离子浓度为1 mmol/L时破碎液漆酶活性较高，达到295 U/mL。菌株的表达量受铜离子浓度影响变化幅度较大，通过对铜离子添加条件的探究，对改善细菌漆酶表达量较低的问题有重要参考价值。
关键词：细菌漆酶;;异源表达;;定点突变;;蛋白表达量;;铜离子
基金资助：安徽科技学院引进人才项目(SKYJ202006);安徽科技学院大学生创新课题项目(S202210879289);安徽科技学院横向合作项目(880578);; 安徽省高校自然科学研究重点项目(2022AH051635)
