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作者:杨永琪;郑火建;王琴;郝彦利;李艳艳;齐灿灿;汪立平;
单位:上海海洋大学食品学院;克拉玛依绿成农业开发有限责任公司;农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室;上海海洋大学食品热加工工程技术研究中心;
摘要:以具有抑制副溶血性弧菌作用的枯草芽孢杆菌H19(Bacillus subtilis H19,B. subtilis H19)为研究对象,为进一步研究其所产细菌素的性质和活性,将B. subtilis H19发酵上清液经粗提、层析以及高效液相纯化细菌素,MALDI-TOF鉴定分子量,并结合第三代分子测序技术,通过COG数据库,GO数据库以及KEGG代谢途径注释B. subtilis H19的功能基因,ARDB数据库预测耐药基因,antiSMASH软件分析细菌素合成基因簇。结果显示,细菌素BH19最终纯化460.73倍,比活性达到307692.31 AU/mg,分子量为1042.00 Da。B. subtilis H19基因组总长度为3595203 bp,基因功能注释发现H19具有较强的氨基酸和糖转运代谢能力,并含有多个细菌素关键转运蛋白ABC蛋白。经分析,全基因组中不存在抗生素耐药性基因,共获得了6个细菌素合成基因簇,其中基因簇2为NRPS类基因簇,分子量为1036.34 Da,与质谱结果相似度达到99.46%,且基因簇2与解淀粉芽孢杆菌产生的表面活性素(Surfactin)同源性较低,为82.00%。综上所述,细菌素BH19可能为B. subtilis H19产生的一种新型细菌素,该研究为B. subtilis H19及其所产细菌素BH19在天然防腐剂领域的开发和应用提供参考。
关键词:枯草芽孢杆菌;;细菌素;;分离纯化;;质谱;;全基因组测序
基金资助:2024年上海海洋大学校企联合示范课程项目(A1-2008-24-300022);; 克拉玛依市2025年度科技计划项目-技术创新引导计划项目(2025CA0021)