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作者：程露;柴文琦;杨淑婷;崔岱宗;
单位：东北林业大学生命科学学院;黑龙江省酶与类酶工程重点实验室;
摘要：生物活性肽是指能够对人体健康产生积极影响的特定蛋白质片段，因其易被细胞转运、吸收利用率高、毒性和免疫原性较低等优点而在生物医药和保健食品开发中备受关注。该文选择微生物发酵法制备松子活性肽，通过对14株菌株初筛与复筛，并通过生理生化特征和分子生物学对酶活力最高的菌株N-LYS-20进行鉴定，鉴定出为枯草芽孢杆菌。通过蛋白酶抑制剂、邻苯二甲醛法、考马斯亮蓝法和茚三酮法对菌株N-LYS-20的产酶类型、水解度、发酵液中肽含量及氨基酸含量进行探究。该研究表明了菌株N-LYS-20主要分泌丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶，蛋白酶活力在40 h达到最高值(325.62 U/mL);水解度在发酵中总体呈现上升趋势，于48 h达到最高值(27.6%);多肽(>3 kDa)含量由4 h的622.26 mg/mL到28 h达到峰值1 456.23 mg/mL之后于48 h降为712.83 mg/mL;氨基酸含量从4 h的0.067 mg/mL于44 h达到最高值0.589 mg/mL,以上表明了菌株N-LYS-20具有良好、可持续性地将松子蛋白水解成肽(<3 kDa)和游离氨基酸的能力。综上，该研究探讨了关于发酵菌株的筛选与其产蛋白酶类型的分析，有望为发酵松子蛋白的相关研究提供发酵菌株产酶能力及产酶类型上的参考；该研究主要针对松子蛋白发酵过程中的水解度、肽含量和氨基酸含量的动态变化进行探究，有望为微生物水解松子蛋白的水解效率和松子肽产量的相关研究提供数据参考。
关键词：芽孢杆菌;;松子蛋白;;蛋白酶;;松子肽;;发酵
基金资助：黑龙江省重点研发计划(创新基地)项目(JD2023SJ14)
