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作者：李泽浩;王婉莹;王子轩;张佳月;张婷;王果果;王婧玥;段至柔;张璐璐;
单位：河南工业大学粮油食品学院;河南工业大学国际教育学院;
摘要：天然萜类化合物二氢香芹酮在医药、食品、化妆品、以及化工等领域具有广泛的应用，可由香芹酮经烯还原酶催化制备，但反应过程中所需的辅酶NAD(P)H价格昂贵，是进行大规模生产的限制性因素。该研究克隆表达了来自枯草芽孢杆菌的葡萄糖脱氢酶(glucose dehydrogenase, GDH),并基于前期获得的克雷伯杆菌烯还原酶KlebER1A303N,通过共表达和融合表达策略构建了KlebER1A303N和GDH在大肠杆菌中的共表达体系，比较和分析了在不同策略下目的蛋白表达的差异及其催化合成二氢香芹酮的差异。结果表明，共表达和融合表达均能成功表达出所需的目的蛋白，并且催化香芹酮生成二氢香芹酮，但融合表达的效果优于共表达，在反应3 h后，转化率达50%。此外，在融合表达中，基因的排列顺序对工程菌催化合成二氢香芹酮也有一定的影响。该研究为建立高效、低成本的二氢香芹酮工业化生产方法提供了基础。
关键词：烯还原酶;;葡萄糖脱氢酶;;共表达;;二氢香芹酮;;NADPH
基金资助：河南省科技研发计划联合基金项目(242103810080);; 郑州市科技局自然科学项目协同创新专项(22ZZRDZX26);; 河南工业大学粮油食品学院省部级科研平台开放课题项目(GO202420);河南工业大学“双一流”本科生科技创新能力提升专项(HN-HautFood IAEG-023);河南工业大学院级本科教育教学改革研究与实践项目科创项目(GJXY202410)
