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作者:毛禹清;高坤辉;刘曾丽;陈勉华;
单位:天津科技大学食品科学与工程学院;
摘要:为研究红曲黄素C(monascinol, MC)、红曲素(monascin, MS)和红曲黄素(ankaflavin, AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography, TLC)和HPLC进行纯度分析。构建2μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导人THP-1巨噬细胞和小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型,并进行形态学观察,利用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)法测定细胞活力,以MS和AK作为参比,实时荧光定量法(quantitative real-time polymerase chain reaction, RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定红曲黄色素MC对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。结果表明,提取出的红曲黄色素MC纯度能达到98%以上,可用于细胞实验。6μg/mL的MC、MS和AK诱导THP-1细胞24 h后,细胞存活率均能达到90%以上,符合实验要求。6μg/mL的MC、MS和AK处理THP-1细胞和RAW264.7细胞24 h后,在转录水平和翻译水平上均显著抑制了IL-6的表达(P<0.01)。MC在转录水平和翻译水平上显著抑制了THP-1细胞和RAW264.7细胞中TNF-α的表达量(P<0.01),MS和AK仅在翻译水平上显著抑制了RAW264.7细胞TNF-α的分泌(P<0.01)。
关键词:红曲黄色素;;THP-1细胞;;RAW264.7细胞;;抗炎作用;;促炎细胞因子
基金资助:国家自然科学基金面上项目(31271915)