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作者：赵星莹;曾伟主;周景文;
单位：江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室;江南大学,未来食品科学中心;
摘要：熊果酸是一种五环三萜类化合物，具有抗炎、抗氧化等作用，广泛应用于医药、化妆品等领域。为提高酿酒酵母中熊果酸的产量，该研究采用了代谢工程的“推-拉”策略。首先，通过异源表达和优化CADDS、CaCYP716A83和HtCPR,实现了熊果酸的从头合成，其产量为5.4 mg/L。随后，通过扩大内质网面积，为膜蛋白酶提供更多的附着面积，熊果酸产量达到40.3 mg/L。由于熊果酸合成路径中涉及多个氧化还原反应，NADPH是必需的辅因子，强化NADPH供给后，熊果酸产量提升至48.2 mg/L。此外，通过优化电子传递链，利用细胞色素b5参与第二个电子向P450酶转移，增强反应中的电子供给，熊果酸产量达到74.6 mg/L。最后，将扩大内质网、增强NADPH及电子传递、调节CaCYP716A83和HtCPR拷贝数等策略进行迭代整合，熊果酸产量达到84.3 mg/L。该研究为构建高效合成萜类化合物的微生物细胞工厂提供了参考。
关键词：熊果酸;;酿酒酵母;;内质网;;NADPH;;细胞色素b5
基金资助：国家自然科学基金创新研究群体项目(32021005)
