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作者：杜祥坤;费康清;王亚森;白佳文;中西秀树;李子杰;
单位：江南大学生物工程学院;
摘要：乙醛是对人体有毒的化合物，乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase, ALDH)能将乙醛氧化为无毒的乙酸，同时将NAD(P)~+转化为NAD(P)H。目前检测乙醛的方法繁琐且耗时费力，该研究采用酿酒酵母孢子“微胶囊”表面展示热带假丝酵母(Candida tropicalis)LBBE-W1来源的乙醛脱氢酶，建立一种新颖快速检测乙醛的方法。首先，基于蛋白质免疫印迹与荧光结果证实ALDH能够在孢子中表达且定位在孢子壁上。然后，测定了孢子表面展示ALDH与游离ALDH的酶学性质。结果显示，孢子表面展示ALDH和游离酶的最适温度与pH值分别为40℃和9.0;与游离酶相比，孢子表面展示ALDH具有更高的活性，以及更佳的温度与pH稳定性。此外，孢子表面展示ALDH对十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)、蛋白酶K具有更强的耐受性；孢子表面展示ALDH与游离乙醛脱氢酶的最适底物都是乙醛，并且孢子表面展示ALDH具有良好的重复使用性能。最后，将孢子表面展示ALDH作为生物传感器检测乙醛，结果表明在0～500μmol/L的乙醛浓度范围内具有良好的线性关系，其R~2值为0.999 2。该研究成功构建一种新颖的生物传感器，为乙醛的检测提供一种新的方法。
关键词：孢子表面展示;;乙醛脱氢酶;;生物传感器;;酿酒酵母;;乙醛检测
基金资助：国家自然科学基金(32171475)
