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作者:凌春榕;杨小雁;耿嘉宝;毛银;赵运英;邓禹;
单位:江南大学,粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心;江南大学,江苏省生物活性产品加工工程研究中心;山东渤海实业集团有限公司,山东省油脂油料精深加工技术重点实验室;
摘要:丙二酸作为一种重要的二元羧酸,广泛应用于多种领域。但目前由于生物法合成丙二酸产量较低,不适合进行工业化生产。为提高丙二酸的生物法合成能力,该文以大肠杆菌BL21(DE3)为底盘细胞,通过过量表达ppc、aspA、panD、sdhC、pa0132及yneI基因,构建了丙二酸生物合成工程菌BL21(PPP)。在摇瓶条件下,对该菌株的发酵条件进行了优化,丙二酸合成量达0.48 g/L,较优化前提高了1倍。同时,该文探究了外源添加生物素及富马酸对丙二酸合成的影响,在添加75μg/L生物素的发酵条件下,丙二酸的产量较对照组提高了32.59%;在添加终质量浓度为8 g/L的富马酸的条件下,该菌株可合成1.2 g/L丙二酸。在5 L发酵罐中,该菌株最高可以合成12.42 g/L的丙二酸。该文实现了丙二酸在大肠杆菌BL21(DE3)中的生物合成,并通过对发酵条件的优化进一步提高了丙二酸的产量,为更进一步提高丙二酸产量奠定了基础。
关键词:大肠杆菌;;丙二酸;;富马酸;;生物合成;;发酵优化
基金资助:国家重点研发计划项目(2022YFA0911801,2022YFA0911804);; 江苏省杰出青年基金项目(SBK2022010219);; 山东省重点研发计划项目(2022CXPT042)