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作者:张倩丽;彭政;张娟;
单位:江南大学未来食品科学中心;江南大学生物工程学院;
摘要:5-羟基色氨酸是一种非蛋白质氨基酸,是血清素的重要前体物质,可以改善情绪,减轻抑郁症状,具有广泛的市场需求。酶催化法生产5-羟基色氨酸具有环境友好和不受季节限制的优点,但转化效率不高。该研究旨在通过提高色氨酸羟化酶的表达量及其催化活性,实现5-羟基色氨酸的高效转化。首先,通过对大肠杆菌进行基因组编辑,减少底物和产物的降解。其次,通过引入促溶标签、N端截短和启动子优化,成功获得突变体B10,实现了底物质量转化率从7.5%提升至48%。最后,通过对酶分子进行理性设计,增强了酶分子与辅因子之间的相互作用力。在400 mg/L底物质量浓度条件下,突变体E343D实现了98%的底物质量转化率,为5-羟基色氨酸的工业化生产提供了一个有潜力的新方向。
关键词:5-羟基色氨酸;;色氨酸羟化酶;;酶催化;;分子改造
基金资助:国家重点研发计划(2022YFD2101402-02)