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作者：张夕敏;李妍;关欣;堵国成;
单位：江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室;江南大学,未来食品科学中心;江苏省合成生物基础研究中心;
摘要：为了高效获取种子细胞以促进细胞培养鱼肉的工业化生产，该研究建立了一种高效可行的乌鳢前脂肪细胞分离和培养技术。该文探讨了胶原酶消化时间和用量对细胞分离效率的影响，检测了细胞外基质对细胞增殖的影响，并利用免疫荧光染色和成脂诱导实验鉴定了乌鳢前脂肪细胞的生物学特性，最后评估了细胞的体外增殖能力。结果显示，以体积分数为0.25%的I型胶原酶进行组织消化，酶用量为2 mL胶原酶每克脂肪组织，消化时间为45 min时前脂肪细胞的分离效率最高；每克脂肪组织的初始细胞释放量可达5×10~6个，贴壁培养后每克脂肪组织的细胞收获数可达1×10~5个；用10 g/L猪明胶预包被有利于前脂肪细胞的增殖；成脂诱导后细胞分化率达100%,表明所培养的细胞具有生产培养脂肪的潜力；分离所获的乌鳢前脂肪细胞可体外连续培养54 d,传代至第6代，细胞扩增约70倍。综上，该研究为未来大规模的细胞扩增和细胞培养鱼肉的工业化生产奠定了基础。
关键词：培养脂肪;;细胞培养鱼肉;;未来食品;;细胞分离;;乌鳢;;前脂肪细胞;;胶原酶
基金资助：浙江大学上海高等研究院繁星科学基金项目(SN-ZJU-SIAS-0013)
