来源：期刊VIP网 时间：
作者：孙明静;刘展志;刘姝含;王留欣;王胜;吴敬;
单位：江南大学生物工程学院;江南大学,食品科学与资源挖掘全国重点实验室;
摘要：随着生活质量的提升，人们对健康的要求也日益增高，代糖逐渐走入人们的视野。D-阿洛酮糖是一种低热量高甜度的稀少糖，是一种理想的蔗糖替代品。工业制备D-阿洛酮糖的工具酶主要为D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-allulose 3-epimerase, DAE),然而要应对工业生产需求，DAE的比活力仍需进一步提升。该研究利用转录因子PsiR构成的D-阿洛酮糖特异型生物传感器，结合荧光激活细胞分选和96孔微孔板筛选，最终获得了比活力提高26.21%的Clostridium cellulolyticum H10来源的DAE(CcDAE)突变体F147L,其最适温度为60℃,最适pH为7.5。该研究不仅成功证明转录因子型生物传感器在蛋白酶定向进化中具有相当高的应用价值，也为DAE的改造提供了新的思路。
关键词：D-阿洛酮糖;;D-阿洛酮糖3-差向异构酶;;定向进化;;生物传感器
基金资助：泰安市科技创新“双十工程”(重大技术攻关)项目(2024JSGG11)
