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作者：黄靖佳;陶秀梅;孔德明;陈星奕;吴敬;陈晟;王蕾;
单位：江南大学生物工程学院;江南大学,食品科学与资源挖掘全国重点实验室;贵州大学酿酒与食品工程学院;
摘要：环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glucosyltransferase, CGTase)制备环糊精(cyclodextrin, CD)时，部分淀粉底物无法被利用，导致淀粉原料利用率以及生产效率低，为解决上述问题，该研究用Escherichia coli BL21(DE3)克隆表达了一种新型淀粉脱支酶，来源于光滑念珠菌(Candida glabrata)的糖原脱支酶(glycogen debranching enzyme, GDE)CgGDE,当摇瓶发酵温度为25℃,诱导剂IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为36 h时，CgGDE的酶活力达69.3 U/mL。酶学性质结果表明，CgGDE的最适pH值为6.0,最适温度为35℃。利用CgGDE与β-CGTase复配制备β-CD,结果表明，在非溶剂条件下，当马铃薯淀粉质量浓度为50 g/L,温度40℃,反应pH值为6.0,CgGDE添加量为750 U/g干淀粉，β-CGTase添加量为7 U/g干淀粉，转化周期24 h时，β-CD转化率为53.1%,比单独使用β-CGTase转化率提高了93.8%,与异淀粉酶β-CGTase联用相比，转化率提高了50.9%,为β-CD在非溶剂条件下的转化奠定了基础。
关键词：糖原脱支酶;;酶学性质;;β-环糊精葡萄糖基转移酶;;β-环糊精;;淀粉
基金资助：江苏省自然科学基金面上项目(BK20221536);; 国家自然科学基金重点项目(32430081);国家自然科学基金青年科学基金项目(32001637);; 贵州省科技厅基础研究计划项目(黔科合基础-ZK[2022]一般043)
