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作者：张启云;陈祖德;姜丽;李冰涛;翟兴英;舒任庚;徐国良;
单位：江西中医药大学,中医基础理论分化发展研究中心;江西省中医病因生物学重点实验室;江西省中药药理学重点实验室;江西中医药大学药学院;
摘要：α-葡萄糖苷酶是治疗糖尿病与肥胖症的关键靶标酶，抑制其活性可有效实现治疗作用。为高效发掘天然产物中靶向α-葡萄糖苷酶的抑制剂，该研究采用磁性纳米颗粒与α-葡萄糖苷酶结合的策略，选择性捕获潜在生物活性化合物，并利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight tandem mass spectrometry, UHPLC-Q-TOF/MS)对捕获成分进行快速鉴定。通过单因素试验确定，当戊二醛体积分数为15%、α-葡萄糖苷酶浓度为7 U/mL、固定反应时间为4 h时，固定化酶的相对活性达最大值。基于优化后的固定化酶体系，经UHPLC-Q-TOF/MS鉴定从青钱柳(Cyclocarya paliurus)提取物中筛选出14种化合物，其中10种活性成分对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用，各活性化合物和阿卡波糖IC_(50)值如下：异绿原酸A(870.3μg/mL)、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(123.9μg/mL)、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷(587.2μg/mL)、槲皮苷(320.9μg/mL)、杨梅素(25.7μg/mL)、金丝桃苷(394.1μg/mL)、阿福豆苷(272.7μg/mL)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(524.9μg/mL)、山柰酚(21.6μg/mL)、槲皮素(31.0μg/mL)和阿卡波糖(0.62μg/mL)。结果表明，固定化酶技术在药用植物潜在治疗化合物的高效发掘中具有重要应用前景。
关键词：青钱柳;;磁性微球固定化酶;;α-葡萄糖苷酶抑制剂;;2型糖尿病
基金资助：江西中医药大学校级科技创新团队发展计划项目(CXTD22015);; 江西省卫生和计划生育委员会-中医药科研课题项目(2024B1441);; 国家自然科学基金项目(82060826)
